La saga de l’OXA-48 : voyage express chez les entérobactéries

La saga de l’OXA-48 : voyage express chez les entérobactéries
François Gravey,1,2 et Sylvain Brisse3
1. Université Caen Normandie, Dynamicure, INSERM UMR U1311, Caen, France

2. CHU de Caen Normandie, Service de bactériologie, Caen, France
3. Institut Pasteur, Université Paris Cité, Unité de recherche Biodiversité et Épidémiologie des Bactéries Pathogènes, Paris, France
Section épidémiologie et génomique des populations de la SFM

L’enzyme oxacillinase 48 (OXA-48) appartient à la classe D des beta-lactamases selon la classification d’Ambler (1). Elle a pour origine l’OXA-54 présente dans le chromosome de Shewanella oneidensis (2). L’OXA-48 a été décrite pour la première fois en 2001 sur un plasmide porté par une souche de Klebsiella pneumoniae isolée à partir d’un examen cytobactériologique des urines à Istanbul en Turquie (3). Responsable d’épisodes sporadiques puis épidémiques en Turquie, elle a été retrouvée à partir des années 2010 au sein de très nombreuses espèces d’Entérobactéries : Escherichia coli, Enterobacter cloacae complex, Providencia rettgeri, Citrobacter freundii et sur tous les continents (4). Dans les pays du bassin méditerranéen, la circulation de cette carbapénèmase est considérée comme endémique, et est responsable d’épidémies intra-hospitalières en Europe, en Afrique du Sud, en Chine et en Australie (4). L’OXA-48 et ses variants (cf. infra) sont les carbapénèmases les plus fréquemment retrouvées en France. Dans une étude réalisée en 2014, les enzymes de type OXA-48-like représentaient 86% d’un panel de plus de 1000 souches françaises d’entérobactéries productrices de carbapénèmases (EPC), très loin devant les New-Delhi Metallo-beta-lactamases NDM (8%) et les Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC) (2%) (5). Le groupe European Survey of Carbapenemase-Producing Enterobacteriaceae (EuSCAPE) classait la situation française au stade quatre, sur une échelle qui en compte cinq, vis-à-vis de la dissémination des OXA-48, c’est-à-dire la présence d’une dissémination interrégionale de l’enzyme à l’échelle du territoire national (6).

L’OXA-48 a une activité hydrolytique vis-à-vis des pénicillines et des carbapénèmes dont l’imipénème, l’ertapénème et le méropénème mais peu ou pas d’activité vis-à-vis des céphalosporines de troisième génération (7). En l’absence d’autre mécanisme de résistance associé, la détection des souches productrices d’OXA-48 peut être difficile du fait de : (i) la faible hydrolyse des carbapénèmes qui peut alors passer inaperçue, et (ii) l’absence de tests phénotypiques simples tels que ceux basés sur les inhibiteurs de beta-lactamases (8). C’est lorsque l’OXA-48 est associée avec d’autres mécanismes de résistances tels que la production de béta-lactamases à spectre étendu (BLSE), une hyperproduction de la céphalosporinase AmpC, une hyperproduction de pompes d’efflux et/ou la fermeture ou perte de porines que les problématiques thérapeutiques se posent (9). Une étude des souches productrices de l’OXA-48 dans les pays Européens et Nord-Africains retrouvait une co-production de l’OXA-48 avec une BLSE dans 75% des cas, principalement la CTX-M-15 (10). Retrouvés chez différentes espèces d’entérobactéries et fréquemment associées à d’autres mécanismes de résistance, les antibiogrammes des souches productrices de l’OXA-48 peuvent être très variables. Il est néanmoins important de noter l’hydrolyse de la témocilline (Figure 1).

Figure 1 : Antibiogrammes en diffusion réalisés sur trois souches d’entérobactéries : une souche de Escherichia coli produisant uniquement l’OXA-48, une souche de Klebsiella pneumniae produisant l’OXA-48 et une bêta-lactamase à spectre étendu (BLSE).et une souche de Citrobacter freundii produisant l’OXA-48, une BLSE et sa céphalosporinase chromosomique. Les phénotypes de résistance aux antibiotiques sont très variables parmi les souches d’Entérobactéries productrices de OXA-48. En effet, la présence de mécanismes de résistance associés (acquis et/ou chromosomiques) limite le nombre de molécules utilisables en pratique clinique.

Fréquemment isolées à partir de prélèvements de dépistage tels que les écouvillonnages rectaux, les souches productrices d’OXA-48 peuvent par la suite être responsables d’infections profondes dans des proportions variables selon les travaux, de 18 à 65% (7, 11). Une étude réalisée aux Pays-Bas retrouvait un taux de mortalité toutes causes confondues de 30% parmi les patients infectés par une souche productrice d’OXA-48 (7).

Actuellement, la base de données des beta-lactamases http://bldb.eu/ contient plus de 50 enzymes décrites comme variants de l’OXA-48, qui constituent la famille des OXA-48 like (12). Ces enzymes présentent des capacités d’hydrolyse pouvant être différentes et certaines ne sont même plus des carbapénèmases mais présentent une affinité uniquement vis-à-vis des C3G, par exemple : OXA-163 et OXA-405 (12, 13).

Les données de la littérature à propos d’épisodes épidémiques de souches productrices d’OXA-48 retrouvent très fréquemment un rapport élevé entre le nombre d’espèces bactériennes isolées et le nombre de patients. Selon les travaux, de 22% à 47% des patients portaient au moment du diagnostic d’EPC plusieurs espèces productrices de OXA-48 allant parfois jusqu’à cinq de façon concomitante (7, 8). A l’inverse des autres types d’enzymes, telles que les NDM, KPC, Verona IMipenase (VIM), dont la dissémination est fréquemment associée à un clone bactérien épidémique, la diffusion de l’OXA-48 a une dynamique populationnelle différente, avant tout basée sur la diffusion du gène de l’enzyme à travers de nombreuses espèces au sein d’un hôte. Cette particularité explique les très nombreuses populations d’entérobactéries au sein desquelles l’OXA-48 a été retrouvée (14).

Ces données s’expliquent par les supports génomiques associés à l’OXA-48. Le gène de l’OXA-48 est inséré au sein du transposon Tn1999 dont il existe actuellement cinq formes variantes (Figure 2) (4). Dans sa forme la plus simple Tn1999.1, le transposon est composé de deux séquences d’insertion IS1999 en miroir qui entourent le gène blaOXA-48, un gène codant pour un régulateur transcriptionnel LysR, et un fragment d’un gène codant pour une acetyl coenzyme A carboxylase. Les transposons Tn1999.2 et Tn1999.3 portent en plus, tous les deux, une copie de la séquence d’insertion IS1R en amont du gène blaOXA-48 (Figure 2). Le Tn1999.3 aussi porte une seconde copie de l’IS1R située entre les gènes blaOXA-48 et lysR. La présence de la séquence d’insertion IS1R en amont du gène blaOXA-48 créé un promoteur fort responsable d’une activité enzymatique deux fois plus importante (Figure 2) (4). Les transposons Tn1999.4 et Tn1999.5 sont tous les deux des variants du Tn1999.2. Dans chacun d’entre eux, le gène lysR est tronqué par l’insertion du transposon Tn2015 porteur du gène de la BLSE blaCTX-M-15 (variant Tn1999.4) et la séquence d’insertion ISKpn19 (Tn1999.5) (Figure 2). Dans une étude portant sur plus de 100 souches productrices de OXA-48 isolées entre 2001 et 2011 en Europe et en Afrique du Nord, le Transposon Tn1999.2 était le variant le plus fréquemment retrouvé (78%) (10). Le motif génomique d’insertion reconnu par le Tn1999 consiste en une duplication d’un motif cible de neuf paires de bases : CGTTCAGCA présentes dans le gène tir, qui code pour protéine d’inhibition de transfert (15, 16). Des études de conjugaison ont démontré que l’interruption du gène tir par l’insertion du transposon Tn1999 engendre la synthèse d’une protéine non fonctionnelle et de ce fait, une augmentation de 50 à 100 fois le taux de transfert conjugatif du plasmide (16).

Figure 2 : Différentes organisation des transposons Tn1999 porteurs du gène blaOXA-48 et son promoteur lysR.

Les transposons Tn1999 porteurs de l’OXA-48 sont retrouvés au sein de plasmides de type IncL dans plus de 90% des cas tandis que les autres carbapénèmases telles que KPC et NDM sont souvent trouvées sur des plasmides appartenant aux groupes IncF et IncN (10, 17). Les plasmides IncL mesurent entre 60 et 70 kb et, classiquement, ils ne contiennent pas d’autres gènes de résistance aux antibiotiques et sont en faible nombre de copies dans la cellule (8, 15, 17, 18). Ils portent également des opérons de transfert tra et trb qui codent pour les pili de type IV impliqués dans le mécanisme de conjugaison. Des travaux ont démontré le possible transfert de ces plasmides entre espèces d’Entérobactéries mais n’ont pas réussi à transmettre le plasmide à des souches de Pseudomonas aeruginosa et Acinetobacter baumannii. Ces données peuvent expliquer l’association de l’OXA-48 avec les entérobactéries (15). Certains de ces plasmides sont bien décrits dans la littérature : E71T isolé lors d’une épidémie de K. pneumoniae productrices de OXA-48 en Irlande ou pOXA-48-4963A dans une étude réalisée en république Tchèque (8, 19). Les OXA-48 ont été retrouvées dans d’autres types de plasmides que IncL, chez lesquels l’insertion du transposon ne s’est pas effectuée sur le gène tir. Par exemple, le transposon Tn1999 a été retrouvé au sein d’un plasmide non groupable de 150 kb isolé d’une souche de K. pneumoniae, dans lequel Tn1999 interrompait un gène codant pour une phosphoadenosine phosphosulfate reductase (8, 18).

Enfin, des intégrations chromosomiques de l’OXA-48 ont été décrites. L’insertion de l’enzyme se fait via le transposon Tn6237, notamment au sein du clone de Escherichia coli ST38 (20).

Les souches productrices d’OXA-48 n’ont pas été exclusivement isolées de prélèvements humains. En effet, des études ont retrouvé des bactéries productrices d’OXA-48 à partir de prélèvements environnementaux réalisés dans les hôpitaux en contexte épidémique : surfaces, matelas, éviers, toilettes ; mais aussi à partir d’eaux usées, ou d’animaux de compagnie (chats, chiens, chevaux) (14). Tous ces réservoirs constituent des routes de transmission possibles jusqu’à l’humain, mais sont sans doute plutôt des contaminants secondaires à partir d’humains.

Conclusions :

Le diagnostic de laboratoire de l’OXA-48 n’est pas toujours évident du fait de sa faible hydrolyse des carbapénèmes et l’absence de tests phénotypiques dédiés. Sur les plasmides de type IncL, le transposon Tn1999 s’insère au sein du gène tir, ce qui a pour effet de décupler les capacités conjugatives des plasmides et explique l’ampleur de la diffusion de l’OXA-48. Autres conséquences, les patients sont souvent porteurs au même moment de différentes espèces productrices d’OXA-48. Tous ces éléments concourent à une grande capacité épidémique de ce mécanisme de résistance. Aussi, la présence de plusieurs espèces productrices d’OXA-48 n’est que faussement rassurante et doit déclencher des explorations plus précises sur les liens épidémiologiques entre souches et plasmides, s’appuyant sur de nouvelles technologies de séquençage à haut débit, y compris de troisième génération (‘long read sequencing’).

 

Bibliographie

  1. Ramette A, Gasser M, Nordmann P, Zbinden R, Schrenzel J, Perisa D, Kronenberg A. 2021. Temporal and regional incidence of carbapenemase-producing Enterobacterales, Switzerland, 2013 to 2018. Eurosurveillance 26.
  2. Poirel L, Héritier C, Nordmann P. 2004. Chromosome-Encoded Ambler Class D β-Lactamase of Shewanella oneidensis as a Progenitor of Carbapenem-Hydrolyzing Oxacillinase. Antimicrob Agents Chemother 48:348–351.
  3. Poirel L, Héritier C, Tolün V, Nordmann P. 2004. Emergence of Oxacillinase-Mediated Resistance to Imipenem in Klebsiella pneumoniae. Antimicrob Agents Chemother 48:15–22.
  4. Pitout JDD, Peirano G, Kock MM, Strydom K-A, Matsumura Y. 2019. The Global Ascendency of OXA-48-Type Carbapenemases. Clin Microbiol Rev 33:e00102-19.
  5. Dortet L, Cuzon G, Ponties V, Nordmann P. 2017. Trends in carbapenemase-producing Enterobacteriaceae, France, 2012 to 2014. Eurosurveillance 22.
  6. Albiger B, Glasner C, Struelens MJ, Grundmann H, Monnet DL, the European Survey of Carbapenemase-Producing Enterobacteriaceae (EuSCAPE) working group. 2015. Carbapenemase-producing Enterobacteriaceae in Europe: assessment by national experts from 38 countries, May 2015. Eurosurveillance 20.
  7. Dautzenberg MJ, Ossewaarde JM, de Kraker ME, van der Zee A, van Burgh S, de Greeff SC, Bijlmer HA, Grundmann H, Cohen Stuart JW, Fluit AC, Troelstra A, Bonten M. 2014. Successful control of a hospital-wide outbreak of OXA-48 producing Enterobacteriaceae in the Netherlands, 2009 to 2011. Eurosurveillance 19.
  8. Skalova A, Chudejova K, Rotova V, Medvecky M, Studentova V, Chudackova E, Lavicka P, Bergerova T, Jakubu V, Zemlickova H, Papagiannitsis CC, Hrabak J. 2017. Molecular Characterization of OXA-48-Like-Producing Enterobacteriaceae in the Czech Republic and Evidence for Horizontal Transfer of pOXA-48-Like Plasmids. Antimicrob Agents Chemother 61:e01889-16.
  9. Nordmann P, Naas T, Poirel L. 2011. Global Spread of Carbapenemase-producing Enterobacteriaceae. Emerg Infect Dis 17:1791–1798.
  10. Potron A, Poirel L, Rondinaud E, Nordmann P. 2013. Intercontinental spread of OXA-48 beta-lactamase-producing Enterobacteriaceae over a 11-year period, 2001 to 2011. Eurosurveillance 18.
  11. Jolivet S, Couturier J, Vuillemin X, Gouot C, Nesa D, Adam M, Brissot E, Mohty M, Bonnin RA, Dortet L, Barbut F. 2021. Outbreak of OXA-48-producing Enterobacterales in a haematological ward associated with an uncommon environmental reservoir, France, 2016 to 2019. Eurosurveillance 26.
  12. Dabos L, Oueslati S, Bernabeu S, Bonnin RA, Dortet L, Naas T. 2022. To Be or Not to Be an OXA-48 Carbapenemase. Microorganisms 10:258.
  13. Oueslati S, Retailleau P, Marchini L, Dortet L, Bonnin RA, Iorga BI, Naas T. 2019. Biochemical and Structural Characterization of OXA-405, an OXA-48 Variant with Extended-Spectrum β-Lactamase Activity. Microorganisms 8:24.
  14. Mairi A, Pantel A, Sotto A, Lavigne J-P, Touati A. 2018. OXA-48-like carbapenemases producing Enterobacteriaceae in different niches. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 37:587–604.
  15. Poirel L, Bonnin RA, Nordmann P. 2012. Genetic Features of the Widespread Plasmid Coding for the Carbapenemase OXA-48. Antimicrob Agents Chemother 56:559–562.
  16. Potron A, Poirel L, Nordmann P. 2014. Derepressed Transfer Properties Leading to the Efficient Spread of the Plasmid Encoding Carbapenemase OXA-48. Antimicrob Agents Chemother 58:467–471.
  17. Kopotsa K, Osei Sekyere J, Mbelle NM. 2019. Plasmid evolution in carbapenemase‐producing Enterobacteriaceae : a review. Ann N Y Acad Sci 1457:61–91.
  18. Carrër A, Poirel L, Yilmaz M, Akan ÖA, Feriha C, Cuzon G, Matar G, Honderlick P, Nordmann P. 2010. Spread of OXA-48-Encoding Plasmid in Turkey and Beyond. Antimicrob Agents Chemother 54:1369–1373.
  19. Power K, Wang J, Karczmarczyk M, Crowley B, Cotter M, Haughton P, Lynch M, Schaffer K, Fanning S. 2014. Molecular Analysis of OXA-48-Carrying Conjugative IncL/M-Like Plasmids in Clinical Isolates of Klebsiella pneumoniae in Ireland. Microb Drug Resist 20:270–274.
  20. Turton JF, Doumith M, Hopkins KL, Perry C, Meunier D, Woodford N. 2016. Clonal expansion of Escherichia coli ST38 carrying a chromosomally integrated OXA-48 carbapenemase gene. J Med Microbiol 65:538–546.
Partager cet Article
Avez-vous aimé cet article ?
6 0
212 Comments
  1. Répondre
  2. Répondre
  3. Répondre
  4. Услуга сноса старых частных домов и вывоза мусора в Москве и Подмосковье под ключ от нашей компании. Работаем в указанном регионе, предлагаем услугу уборка сгоревшего дома. Наши тарифы ниже рыночных, а выполнение работ гарантируем в течение 24 часов. Бесплатно выезжаем для оценки и консультаций на объект. Звоните нам или оставляйте заявку на сайте для получения подробной информации и расчета стоимости услуг.

    Répondre
  5. Répondre
  6. Répondre
  7. Répondre
  8. Répondre
  9. Répondre
  10. Répondre
  11. Забудьте о низких позициях в поиске! Наше SEO продвижение https://seopoiskovye.ru/ под ключ выведет ваш сайт на вершины Google и Yandex. Анализ конкурентов, глубокая оптимизация, качественные ссылки — всё для вашего бизнеса. Получите поток целевых клиентов уже сегодня!

    Répondre
  12. Забудьте о низких позициях в поиске! Наше SEO продвижение и оптимизация на заказ https://seosistemy.ru/ выведут ваш сайт в топ, увеличивая его видимость и привлекая потенциальных клиентов. Индивидуальный подход, глубокий анализ ключевых слов, качественное наполнение контентом — мы сделаем всё, чтобы ваш бизнес процветал.

    Répondre
  13. Дайте вашему сайту заслуженное место в топе поисковых систем! Наши услуги
    заказать сео продвижение сайта на заказ обеспечат максимальную видимость вашего бизнеса в интернете. Персонализированные стратегии, тщательный подбор ключевых слов, оптимизация контента и технические улучшения — всё это для привлечения целевой аудитории и увеличения продаж. Вместе мы поднимем ваш сайт на новый уровень успеха!

    Répondre
  14. Дайте вашему сайту заслуженное место в топе поисковых систем! Наши услуги
    раскручивать сайт цена на заказ обеспечат максимальную видимость вашего бизнеса в интернете. Персонализированные стратегии, тщательный подбор ключевых слов, оптимизация контента и технические улучшения — всё это для привлечения целевой аудитории и увеличения продаж. Вместе мы поднимем ваш сайт на новый уровень успеха!

    Répondre
  15. god

    Répondre
  16. Дайте вашему сайту заслуженное место в топе поисковых систем! Наши услуги
    оптимизация сайта стоимость на заказ обеспечат максимальную видимость вашего бизнеса в интернете. Персонализированные стратегии, тщательный подбор ключевых слов, оптимизация контента и технические улучшения — всё это для привлечения целевой аудитории и увеличения продаж. Вместе мы поднимем ваш сайт на новый уровень успеха!

    Répondre
  17. Hi friends, How’s everything going? What do you want to say about this paragraph? I think it’s really well-designed.

    Répondre
  18. Fantastic blog, please keep it up. I really enjoy it when individuals get together and share ideas.

    Répondre
  19. Greetings! I would like to express my gratitude for the excellent information provided in this piece. I’ll definitely be returning to your blog soon to read more.

    Répondre
  20. Hello friends In my opinion, this paragraph is really fantastically built for me. How is everything else? What do you want to say about it?

    Répondre
  21. Great blog, please keep it up. I love it when individuals get together and share ideas.

    Répondre
  22. Hey there! I just wanted to say how awesome your page is and how much excellent information you have here. Probably in the near future, I’ll return to your blog to read more.

    Répondre
  23. Hey guys How’s everything? What do you want to say about this paragraph? I think it’s really well-designed for me.

    Répondre
  24. I adore it when individuals get together and share ideas. Excellent blog; please keep it up.

    Répondre
  25. Hi there! I simply wanted to offer a big thumbs up for the excellent information you have right here on this piece. I most likely will return to your blog in the near future to read more.

    Répondre
  26. Hello friends, How’s everything doing, and what you would like to say about this paragraph? In my opinion, it’s really fantastic how it was constructed.

    Répondre
  27. I think it’s wonderful when individuals get together and share ideas. Excellent blog, keep it up.

    Répondre
  28. Hi there! I just wanted to offer a big thumbs up for the excellent information you have right here on this piece. I will most likely return to your blog in the near future to read more.

    Répondre
  29. Hello, World!
    Hey there, mate! Greetings from your favorite surfing capybara!
    How’s the surf today?
    Ready to catch some gnarly waves together?
    https://capybara888.wordpress.com/
    Good luck!

    Répondre
  30. Répondre
  31. Hello, World!
    Hey there, mate! Greetings from your favorite surfing capybara!
    How’s the surf today?
    Ready to catch some gnarly waves together?
    https://capybara0006.wordpress.com/
    Good luck!

    Répondre
  32. Répondre
  33. Répondre
  34. Its perfectly written. I enjoy what youve have got to say. But you could a bit more in the way of content so people could connect to it better. ufa168

    Répondre
  35. I really appreciate this wonderful post that you have provided for us. I assure this would be beneficial for most of the people. ufa168

    Répondre
  36. Répondre
  37. Répondre
  38. Répondre
  39. Répondre
  40. Répondre
  41. generic atorvastatin 10mg buy atorvastatin 10mg pill order lipitor 40mg

    Répondre
  42. Répondre
  43. Répondre
  44. Hello, World!
    Hey there, mate! Greetings from your favorite surfing capybara!
    How’s the surf today?
    Ready to catch some gnarly waves together?
    https://capybara444.wordpress.com
    Good luck!

    Répondre
  45. Répondre
  46. Répondre
  47. Répondre
  48. Hello, World!
    Hey there, mate! Greetings from your favorite surfing capybara!
    How’s the surf today?
    Ready to catch some gnarly waves together?
    https://capybara235.wordpress.com
    Good luck!

    Répondre
  49. Répondre
  50. Répondre
  51. Répondre
  52. Répondre
  53. Répondre
  54. Здравствуйте!

    Было ли у вас опыт написания дипломной работы в крайне сжатые сроки? Это действительно требует огромной ответственности и трудоемкости, однако важно сохранять упорство и продолжать активно участвовать в учебном процессе, как я это делаю.
    Для тех, кто умеет эффективно искать и анализировать информацию в интернете, это действительно помогает в процессе согласования и написания дипломной работы. Больше не нужно тратить время на посещение библиотек или организацию встреч с научным руководителем. Здесь, на этом ресурсе, предоставлены надежные данные для заказа и написания дипломных и курсовых работ с гарантией качества и доставкой по всей России. Можете ознакомиться с предложениями по ссылке https://server-diploms.com, это проверенный источник!

    купить диплом института
    купить диплом цена
    купить диплом университета
    купить аттестат

    Желаю всем отличных оценок!

    Répondre
  55. Здравствуйте!

    Бывало ли у вас такое, что приходилось писать дипломную работу в очень ограниченные сроки? Это действительно требует большой ответственности и тяжелого труда, но важно не сдаваться и продолжать активно заниматься учебными процессами, так же, как и я.
    Для тех, кто умеет эффективно использовать интернет для поиска и анализа информации, это действительно облегчает процесс согласования и написания дипломной работы. Не нужно тратить время на посещение библиотек или организацию встреч с дипломным руководителем. Здесь представлены надежные данные для заказа и написания дипломных и курсовых работ с гарантией качества и доставкой по всей России. Можете ознакомиться с предложениями по ссылке https://saksx-diploms24.com, это проверенный способ!

    купить аттестат школы
    купить диплом о среднем образовании
    купить диплом университета
    купить диплом о среднем специальном
    купить диплом института
    купить диплом нового образца
    купить диплом ссср
    купить диплом колледжа
    купить диплом
    купить диплом магистра

    Желаю всем отличных оценок!

    Répondre
  56. สล็อต ufa789 เว็บพนันครบวงจร แทงบอล บาคาร่า สล็อต ครบจบที่เดียว

    Répondre
  57. Привет всем!

    Бывали ли у вас случаи, когда приходилось писать дипломную работу в крайне сжатые сроки? Это действительно требует большой ответственности и напряженного труда, но важно не унывать и продолжать активно участвовать в учебном процессе, как я и делаю.
    Для тех, кто умеет эффективно находить и использовать информацию в интернете, это может существенно облегчить процесс согласования и написания дипломной работы. Больше не нужно тратить время на посещение библиотек или организацию встреч с научным руководителем. Здесь, на этом ресурсе, предоставлены надежные данные для заказа и написания дипломных и курсовых работ с гарантией качества и доставкой по всей России. Можете ознакомиться с предложениями на https://saksx-diploms24.com, это проверено!

    купить аттестат школы
    купить диплом цена
    купить диплом специалиста
    купить диплом Гознак
    купить диплом института
    купить диплом магистра
    купить диплом о высшем образовании
    купить диплом о среднем специальном
    купить диплом Вуза
    купить диплом о среднем образовании

    Желаю всем отличных оценок!

    Répondre
  58. Здравствуйте!

    Бывали ли у вас случаи, когда приходилось писать дипломную работу в крайне сжатые сроки? Это действительно требует большой ответственности и напряженного труда, но важно не унывать и продолжать активно участвовать в учебном процессе, как я и делаю.
    Для тех, кто умеет эффективно находить и использовать информацию в интернете, это может существенно облегчить процесс согласования и написания дипломной работы. Больше не нужно тратить время на посещение библиотек или организацию встреч с научным руководителем. Здесь, на этом ресурсе, предоставлены надежные данные для заказа и написания дипломных и курсовых работ с гарантией качества и доставкой по всей России. Можете ознакомиться с предложениями на https://1russa-diploms.com, это проверено!

    купить диплом техникума
    купить аттестат
    купить диплом магистра
    купить диплом
    купить диплом Гознак

    Желаю всем отличных оценок!

    Répondre
  59. Привет всем!

    Было ли у вас когда-нибудь такое, что приходилось писать дипломную работу в сжатые сроки? Это действительно требует огромной ответственности и напряженных усилий, но важно не сдаваться и продолжать активно заниматься учебными процессами, чем я и занимаюсь.
    Для тех, кто умеет искать и анализировать информацию в интернете, это действительно помогает в процессе согласования и написания дипломной работы. Не нужно тратить время на посещение библиотек или организацию встреч с дипломным руководителем. Здесь представлены надежные данные для заказа и написания дипломных и курсовых работ с гарантией качества и доставкой по России. Можете ознакомиться с предложениями по ссылке https://2orik-diploms.com, проверено!

    купить диплом о среднем образовании
    купить диплом университета
    купить диплом колледжа
    купить диплом техникума
    купить диплом специалиста

    Желаю всем отличных оценок!

    Répondre
  60. Привет всем!

    Бывало ли у вас такое, что приходилось писать дипломную работу в очень ограниченные сроки? Это действительно требует большой ответственности и тяжелого труда, но важно не сдаваться и продолжать активно заниматься учебными процессами, так же, как и я.
    Для тех, кто умеет эффективно использовать интернет для поиска и анализа информации, это действительно облегчает процесс согласования и написания дипломной работы. Не нужно тратить время на посещение библиотек или организацию встреч с дипломным руководителем. Здесь представлены надежные данные для заказа и написания дипломных и курсовых работ с гарантией качества и доставкой по всей России. Можете ознакомиться с предложениями по ссылке https://server-diploms.com, это проверенный способ!

    купить диплом Вуза
    купить диплом колледжа
    купить диплом цена
    купить диплом университета

    Желаю всем отличных оценок!

    Répondre
  61. Привет всем!

    Бывало ли у вас такое, что приходилось писать дипломную работу в крайне сжатые сроки? Это действительно требует огромной ответственности и напряженных усилий, но важно не опускать руки и продолжать активно заниматься учебными процессами, как я.
    Для тех, кто умеет быстро находить и анализировать информацию в сети, это действительно помогает в процессе согласования и написания дипломной работы. Больше не нужно тратить время на посещение библиотек или устраивать встречи с дипломным руководителем. Здесь, на этом ресурсе, предоставлены надежные данные для заказа и написания дипломных и курсовых работ с гарантией качества и доставкой по всей России. Можете ознакомиться с предложениями на сайте https://1russa-diploms.com, это проверено!

    купить диплом Гознак
    купить диплом о высшем образовании
    купить диплом в Москве
    купить диплом колледжа
    купить диплом техникума

    Желаю всем отличных оценок!

    Répondre
  62. Доброго!

    Бывало ли у вас такое, что приходилось писать дипломную работу в очень ограниченные сроки? Это действительно требует большой ответственности и тяжелого труда, но важно не сдаваться и продолжать активно заниматься учебными процессами, так же, как и я.
    Для тех, кто умеет эффективно использовать интернет для поиска и анализа информации, это действительно облегчает процесс согласования и написания дипломной работы. Не нужно тратить время на посещение библиотек или организацию встреч с дипломным руководителем. Здесь представлены надежные данные для заказа и написания дипломных и курсовых работ с гарантией качества и доставкой по всей России. Можете ознакомиться с предложениями по ссылке https://3russkiy-diploms.com, это проверенный способ!

    купить аттестат
    купить диплом ссср
    купить диплом колледжа
    купить диплом нового образца
    купить диплом о высшем образовании

    Желаю всем отличных оценок!

    Répondre
  63. Привет всем!

    Бывало ли у вас такое, что приходилось писать дипломную работу в очень ограниченные сроки? Это действительно требует большой ответственности и тяжелого труда, но важно не сдаваться и продолжать активно заниматься учебными процессами, так же, как и я.
    Для тех, кто умеет эффективно использовать интернет для поиска и анализа информации, это действительно облегчает процесс согласования и написания дипломной работы. Не нужно тратить время на посещение библиотек или организацию встреч с дипломным руководителем. Здесь представлены надежные данные для заказа и написания дипломных и курсовых работ с гарантией качества и доставкой по всей России. Можете ознакомиться с предложениями по ссылке https://2orik-diploms.com, это проверенный способ!

    купить диплом магистра
    купить диплом института
    купить диплом нового образца
    купить диплом специалиста
    купить диплом о высшем образовании

    Желаю всем отличных оценок!

    Répondre
  64. Do you need to earn money without much effort? if you know how to gamble it will be easy for you, if you need more information just visit this site to help you even more.
    https://main7.top/thenine/

    Répondre
  65. Доброго!

    Было ли у вас опыт написания дипломной работы в крайне сжатые сроки? Это действительно требует огромной ответственности и трудоемкости, однако важно сохранять упорство и продолжать активно участвовать в учебном процессе, как я это делаю.
    Для тех, кто умеет эффективно искать и анализировать информацию в интернете, это действительно помогает в процессе согласования и написания дипломной работы. Больше не нужно тратить время на посещение библиотек или организацию встреч с научным руководителем. Здесь, на этом ресурсе, предоставлены надежные данные для заказа и написания дипломных и курсовых работ с гарантией качества и доставкой по всей России. Можете ознакомиться с предложениями по ссылке https://3russkiy-diploms.com, это проверенный источник!

    купить диплом о среднем специальном
    купить диплом в Москве
    купить аттестат школы
    купить диплом о среднем образовании
    купить диплом Вуза

    Желаю всем отличных оценок!

    Répondre
  66. We will guide you through the process of obtaining a reputable and dependable IPL Betting ID Online, granting you access to endless betting opportunities and ensuring an seamless and user-friendly betting journey.

    Répondre
  67. Hello, World!
    Hey there, mate! Greetings from your favorite surfing capybara!
    How’s the surf today?
    Ready to catch some gnarly waves together?
    https://capybara999.wordpress.com/
    Good luck!

    Répondre
  68. order finpecia online cheap buy propecia online cheap fluconazole online

    Répondre
  69. baycip pills – buy keflex 250mg pills order augmentin 375mg without prescription

    Répondre
  70. cipro 1000mg oral – buy myambutol pills for sale buy augmentin 625mg online cheap

    Répondre
  71. Répondre
  72. Répondre
  73. Répondre
  74. Répondre
  75. buy ciprofloxacin 500mg online – purchase doxycycline generic buy erythromycin 500mg sale

    Répondre
  76. Répondre
  77. Répondre
  78. Répondre
  79. Répondre
  80. Répondre
  81. This is awesome. Are you in need of economics writing help online. Look no further, let us help you.

    Répondre
  82. It is soo informative. This is such an amazing post.Are you also searching for assignment writing help we are the best solution for you. We are best known for delivering the best services to students without having to break the bank

    Répondre
  83. Very informative post. This is such an amazing post.Are you also searching for literature review writing help we are the best solution for you. We are best known for delivering the best services to students without having to break the bank

    Répondre
  84. Répondre
  85. Répondre
  86. Répondre
  87. Répondre
  88. Répondre
  89. Répondre
  90. Répondre
  91. buy ivermectin online – buy sumycin for sale tetracycline 250mg sale

    Répondre
  92. Répondre
  93. Excellent write-up

    Répondre
  94. Répondre
  95. Répondre
  96. В нашем кинотеатре https://hdrezka.uno смотреть фильмы и сериалы в хорошем HD-качестве можно смотреть с любого устройства, имеющего доступ в интернет. Наслаждайся кино или телесериалами в любом месте с планшета, смартфона под управлением iOS или Android.

    Répondre
  97. Répondre
  98. Caused a good strong woman like you to walk out my life Komandan88

    Répondre
  99. Good blog. Keep sharing. I love them Are you also searching for dissertation writing help? we are the best solution for you. We are best known for delivering dissertation assignment services to students without having to break the bank

    Répondre
  100. Wonderful. Keep sharing. I love them Are you also searching for accounting writing help? We are the best solution for you. We are best known for delivering accounting writing help to students without having to break the bank

    Répondre
  101. Such authenticity. I love them Are you also searching for Nursing writing help? we are the best solution for you. We are best known for delivering nursing writing help to students without having to break the bank

    Répondre
  102. Répondre
  103. Répondre
  104. https://t.me/crypto_signals_binance_pump/24498/ Standard Price for VIP- membership for 1 Week VIP Membership is 0.0014 BTC, You will do send payment to BTC address 1KEY1iKrdLQCUMFMeK4FEZXiedDris7uGd Discounted price may be different from 0.00075 to 0.00138 BTC, that is why follow to all announces published in our Public channel!

    Répondre
  105. furosemide 40mg drug – purchase candesartan generic capoten 120mg cost

    Répondre
  106. Répondre
  107. purchase ampicillin generic ampicillin ca buy generic amoxicillin online

    Répondre
  108. Répondre
  109. Услуга демонтажа старых частных домов и вывоза мусора в Москве и Подмосковье. Наши специалисты бесплатно выезжают на объект для консультации и оценки объема работ. Мы предлагаем услуги на сайте https://orenvito.ru по доступным ценам и гарантируем качественное выполнение всех работ.
    Для получения более подробной информации и рассчета стоимости наших услуг, вы можете связаться с нами по телефону или заполнить форму заявки на нашем сайте.

    Répondre
  110. Répondre
  111. Услуга демонтажа старых частных домов и вывоза мусора в Москве и Подмосковье от нашей компании. Мы предлагаем демонтаж и вывоз мусора в указанном регионе по доступным ценам. Наша команда https://hoteltramontano.ru гарантирует выполнение услуги в течение 24 часов после заказа. Мы бесплатно оцениваем объект и консультируем клиентов. Узнать подробности и рассчитать стоимость можно по телефону или на нашем сайте.

    Répondre
  112. Услуга демонтажа старых частных домов и вывоза мусора в Москве и Подмосковье от нашей компании. Мы предлагаем демонтаж и вывоз мусора в указанном регионе по доступным ценам. Наша команда гарантирует выполнение услуги снос дома под ключ в течение 24 часов после заказа. Мы бесплатно оцениваем объект и консультируем клиентов.

    Répondre
  113. Répondre
  114. Répondre
  115. Répondre
  116. Лучшие картинки различных тематик https://stilno.site

    Répondre
  117. retrovir online order – purchase avalide online zyloprim online

    Répondre
  118. Slot Mania adalah game online menarik yang memberikan kemenangan besar bagi para pemain di mana pemain juga dapat mengakses game online ini tanpa menggunakan VPN.

    Répondre
  119. Répondre
  120. glycomet 500mg pill – buy generic glucophage lincomycin price

    Répondre
  121. Répondre
  122. Ищете профессиональных грузчиков, которые справятся с любыми задачами быстро и качественно? Наши специалисты обеспечат аккуратную погрузку, транспортировку и разгрузку вашего имущества. Мы гарантируем нанять грузчиков недорого, внимательное отношение к каждой детали и доступные цены на все виды работ.

    Répondre
  123. Répondre
  124. buy clozaril for sale – order famotidine 20mg generic buy famotidine without prescription

    Répondre
  125. Répondre
  126. Répondre
  127. Répondre
  128. Répondre
  129. Предлагаем слуги: https://lit9.ru, демонтаж фундамента, слом домов.

    Répondre
  130. Répondre
  131. Répondre
  132. order hydroxyzine 10mg for sale – prozac pills endep 10mg cost

    Répondre
  133. Услуги грузчиков https://mhpereezd.ru с гарантией!

    Répondre
  134. Répondre
  135. Won’t you show me what it’s like? SUPER138

    Répondre
  136. You’ve got my body, flesh, and bone, yeah TOTAL138

    Répondre
  137. anafranil 25mg us – order paroxetine 10mg order doxepin 75mg without prescription

    Répondre
  138. Répondre
  139. Répondre
  140. THE ONE CARGO บริการ นำเข้าสินค้าจีน บริการสั่งซื้อจากประเทศจีน + นำเข้า (pre order) รับสั่งสินค้า จัดซื้อ จัดหาสินค้าจากจีน ถูกตั้งเเต่กิโลเเรก โอนเงินรวดเร็ว ไม่มีค่าโอน ไม่มีขั้นต่ำ ไม่มีปิดรอบ

    Répondre
  141. Répondre
  142. Répondre
  143. Répondre
  144. Répondre
  145. Répondre
  146. 1. Вибір натяжних стель – як правильно обрати?
    2. Топ-5 популярних кольорів натяжних стель
    3. Як зберегти чистоту натяжних стель?
    4. Відгуки про натяжні стелі: плюси та мінуси
    5. Як підібрати дизайн натяжних стель до інтер’єру?
    6. Інноваційні технології у виробництві натяжних стель
    7. Натяжні стелі з фотопечаттю – оригінальне рішення для кухні
    8. Секрети вдалого монтажу натяжних стель
    9. Як зекономити на встановленні натяжних стель?
    10. Лампи для натяжних стель: які вибрати?
    11. Відтінки синього для натяжних стель – ексклюзивний вибір
    12. Якість матеріалів для натяжних стель: що обирати?
    13. Крок за кроком: як самостійно встановити натяжні стелі
    14. Натяжні стелі в дитячу кімнату: безпека та креативність
    15. Як підтримувати тепло у приміщенні за допомогою натяжних стель
    16. Вибір натяжних стель у ванну кімнату: практичні поради
    17. Натяжні стелі зі структурним покриттям – тренд сучасного дизайну
    18. Індивідуальність у кожному домашньому інтер’єрі: натяжні стелі з друком
    19. Як обрати освітлення для натяжних стель: поради фахівця
    20. Можливості дизайну натяжних стель: від класики до мінімалізму
    натяжні стелі це https://www.natjazhnistelitvhyn.kiev.ua/ .

    Répondre
  147. Répondre
  148. Répondre
  149. 1. Вибір натяжних стель – як правильно обрати?
    2. Топ-5 популярних кольорів натяжних стель
    3. Як зберегти чистоту натяжних стель?
    4. Відгуки про натяжні стелі: плюси та мінуси
    5. Як підібрати дизайн натяжних стель до інтер’єру?
    6. Інноваційні технології у виробництві натяжних стель
    7. Натяжні стелі з фотопечаттю – оригінальне рішення для кухні
    8. Секрети вдалого монтажу натяжних стель
    9. Як зекономити на встановленні натяжних стель?
    10. Лампи для натяжних стель: які вибрати?
    11. Відтінки синього для натяжних стель – ексклюзивний вибір
    12. Якість матеріалів для натяжних стель: що обирати?
    13. Крок за кроком: як самостійно встановити натяжні стелі
    14. Натяжні стелі в дитячу кімнату: безпека та креативність
    15. Як підтримувати тепло у приміщенні за допомогою натяжних стель
    16. Вибір натяжних стель у ванну кімнату: практичні поради
    17. Натяжні стелі зі структурним покриттям – тренд сучасного дизайну
    18. Індивідуальність у кожному домашньому інтер’єрі: натяжні стелі з друком
    19. Як обрати освітлення для натяжних стель: поради фахівця
    20. Можливості дизайну натяжних стель: від класики до мінімалізму
    виготовлення натяжних стель http://www.natjazhnistelitvhyn.kiev.ua .

    Répondre
  150. Répondre
  151. hello there, great article enjoyed reading it LIGAGG88

    Répondre
  152. great information, Don’t forget to visit LIGAPLAY88

    Répondre
  153. воєнторг
    18. Где найти все для военных
    магазин військового спорядження київ інтернет магазин військового одягу .

    Répondre
  154. 1. Почему берцы – это обязательный элемент стиля?
    2. Как выбрать идеальные берцы для осеннего гардероба?
    3. Тренды сезона: кожаные берцы или замшевые?
    4. 5 способов носить берцы с платьем
    5. Какие берцы выбрать для повседневного образа?
    6. Берцы на платформе: комфорт и стиль в одном
    7. Какие берцы будут актуальны в этом году?
    8. Маст-хэв сезона: военные берцы в стиле милитари
    9. 10 вариантов сочетания берцов с джинсами
    10. Зимние берцы: как выбрать модель для холодного сезона
    11. Элегантные берцы на каблуке: идеальный вариант для офиса
    12. Секреты ухода за берцами: как сохранить первоначальный вид?
    13. С какой юбкой носить берцы: советы от стилистов
    14. Как подобрать берцы под фасон брюк?
    15. Берцы на шнуровке: стильный акцент в образе
    16. Берцы-челси: универсальная модель для любого стиля
    17. С чем носить берцы на плоской подошве?
    18. Берцы с ремешками: акцент на деталях
    19. Как выбрать берцы для прогулок по городу?
    20. Топ-5 брендов берцев: качество и стиль в одном
    купити берці зсу бєрци зсу .

    Répondre
  155. воєнторг
    10. Распродажа военного снаряжения
    магазин тактичного одягу магазин військового спорядження київ .

    Répondre
  156. 1. Почему берцы – это обязательный элемент стиля?
    2. Как выбрать идеальные берцы для осеннего гардероба?
    3. Тренды сезона: кожаные берцы или замшевые?
    4. 5 способов носить берцы с платьем
    5. Какие берцы выбрать для повседневного образа?
    6. Берцы на платформе: комфорт и стиль в одном
    7. Какие берцы будут актуальны в этом году?
    8. Маст-хэв сезона: военные берцы в стиле милитари
    9. 10 вариантов сочетания берцов с джинсами
    10. Зимние берцы: как выбрать модель для холодного сезона
    11. Элегантные берцы на каблуке: идеальный вариант для офиса
    12. Секреты ухода за берцами: как сохранить первоначальный вид?
    13. С какой юбкой носить берцы: советы от стилистов
    14. Как подобрать берцы под фасон брюк?
    15. Берцы на шнуровке: стильный акцент в образе
    16. Берцы-челси: универсальная модель для любого стиля
    17. С чем носить берцы на плоской подошве?
    18. Берцы с ремешками: акцент на деталях
    19. Как выбрать берцы для прогулок по городу?
    20. Топ-5 брендов берцев: качество и стиль в одном
    тактичні берці купити talan берці .

    Répondre
  157. buy augmentin 375mg sale – buy acillin online buy cipro paypal

    Répondre
  158. Répondre
  159. Répondre
  160. Répondre
  161. Répondre
  162. Répondre
  163. Répondre
  164. Обзор новинок
    12. BMW: высокий уровень безопасности и комфорта
    bmw x5 m competition bmw x1 m .

    Répondre
  165. Outstanding feature

    Répondre
  166. Répondre
  167. Répondre
  168. Répondre
  169. Подробное руководство
    2. Секреты монтажа гипсокартона: шаг за шагом инструкция
    3. Гипсокартонные конструкции: основные виды и их преимущества
    4. Как сэкономить при покупке гипсокартона: лучшие способы
    5. Простые способы обработки гипсокартона: советы от профессионалов
    6. Интересные идеи использования гипсокартона в интерьере
    7. Все, что вам нужно знать о гипсокартоне: полезная информация
    8. Гипсокартон: обзор популярных брендов и их характеристики
    9. Плюсы и минусы гипсокартона: как правильно выбрать материал
    10. Как сделать ровные стены с помощью гипсокартона: секреты и советы
    11. Гипсокартонные потолки: виды и технологии монтажа
    12. Декорирование гипсокартона: идеи для творческого подхода
    13. Гипсокартон в дизайне интерьера: современные тренды и решения
    14. Преимущества гипсокартона перед другими строительными материалами
    15. Как выбрать правильный инструмент для работы с гипсокартоном
    16. Гипсокартон: надежный материал для обустройства дома
    17. Гипсокартон как элемент декора: необычные способы применения
    18. Технологии монтажа гипсокартона: лучшие практические советы
    19. История и развитие гипсокартона: открытия и достижения
    20. Строительство с использованием гипсокартона: основные этапы и рекомендации
    заказать гипсокартон купить гкл .

    Répondre
  170. Répondre
  171. 1. Как выбрать идеальный гипсокартон для ремонта
    гипсокартон заказать строительные материалы .

    Répondre
  172. Répondre
  173. azithromycin pills – tetracycline sale ciprofloxacin usa

    Répondre
  174. Répondre
  175. Répondre
  176. коляски детские коляска купить .

    Répondre
  177. Répondre
  178. Répondre
  179. Répondre
  180. 1. Идеи для дизайна интерьера
    2. Тренды в дизайне
    3. Как выбрать идеальный цветовой акцент в дизайне
    4. Дизайн-проект
    5. Дизайн нового поколения
    6. Шаг за шагом: создание уютного дизайна спальни
    7. Дизайн для маленькой квартиры
    8. Природный дизайн
    9. Баланс цветов и форм: основы хорошего дизайна
    10. Дизайн-студия: секреты успешного бизнеса в сфере дизайна
    11. Дизайн в XXI веке
    12. Дизайн кухни
    13. Тенденции в сфере дизайна мебели: вдохновляющие идеи
    14. Дизайн гостиной
    15. Минимализм
    16. Дизайн сада: принципы оформления участка с учетом ландшафта
    17. Декорирование с текстилем
    18. Цветовой баланс
    19. Топ-10 книг по дизайну интерьера, которые стоит прочитать
    20. Дизайн комнаты для подростка: креативные идеи для стильного интерьера
    дизайн комнаты https://studiya-dizajna-intererov.ru/ .

    Répondre
  181. Ефективні методи лікування
    10. Як підготуватися до відвідування стоматолога
    дитячі стоматологи https://stomatologiyatrn.ivano-frankivsk.ua/ .

    Répondre
  182. Répondre
  183. 1. 10 лучших идей для дизайна интерьера
    2. Топ-20 трендов в дизайне на 2021 год
    3. Цветовые решения
    4. Секреты успешного дизайн-проекта
    5. Дизайн нового поколения
    6. Дизайн спальни
    7. Дизайн для маленькой квартиры
    8. Природный дизайн
    9. Баланс цветов и форм: основы хорошего дизайна
    10. Дизайн-студия: секреты успешного бизнеса в сфере дизайна
    11. Дизайн в XXI веке
    12. Дизайн кухни
    13. Дизайн мебели
    14. Мастер-класс по созданию стильного дизайна гостиной
    15. Минимализм
    16. Дизайн сада
    17. Декорирование с текстилем
    18. Принципы цветового баланса в дизайне: как создать гармоничное пространство
    19. Топ-10 книг по дизайну интерьера, которые стоит прочитать
    20. Дизайн комнаты для подростка: креативные идеи для стильного интерьера
    дизайнерские проекты квартир дизайнерские проекты квартир .

    Répondre
  184. Répondre
  185. купить кондиционеры купить кондиционеры .

    Répondre
  186. ivermectin 6mg oral – purchase doxycycline online buy cefaclor 500mg pill

    Répondre

Laisser une réponse

Votre adresse e-mail ne sera pas publiée. Les champs requis sont marqués *

You may use these HTML tags and attributes: <a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <s> <strike> <strong>